產(chǎn)品中心
PRODUCT CENTER
革命性細菌DNA提取方式：一步法提取試劑盒
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貨號 |
產(chǎn)品名稱(chēng) |
規格 |
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AE101 |
BcMag? 一步法細菌DNA純化試劑盒 |
50次 |
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AE102 |
BcMag? 一步法細菌DNA純化試劑盒 |
100次 |
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組分 |
存儲條件 |
50 preps，貨號#AE-101 |
100 preps，貨號#AE-102 |
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BcMag? U-DNA Beads |
4°C |
2.5 ml |
5.0 ml |
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10x Lysis Buffer (100mM Tris-HCl, PH 9.0) |
4°C |
0.6 ml |
1.2 ml |
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Proteinase K |
-20°C |
12.5 mg |
25 mg |
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DTT(1M) |
-20°C |
15.4 mg |
30.8 mg |
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Proteinase K Suspension Buffer |
4°C |
1.0 ml |
2.0 ml |
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運輸和儲存：根據下表，在收到貨物時(shí)儲存各組分。
簡(jiǎn)介
提取細菌DNA的標準流程可能非常耗時(shí)，屬于勞動(dòng)密集型的特定應用（如細菌基因分型），需要長(cháng)時(shí)間的DNA提取過(guò)程。例如，傳統的細菌DNA提取需要用蛋白酶K裂解，然后進(jìn)行苯酚：氯仿提取和酒精沉淀。其他技術(shù)，例如二氧化硅結合和洗脫試劑盒，近些年已經(jīng)非常成熟。這些技術(shù)基于陽(yáng)性色譜純化選擇。高濃度的鹽溶液（例如鹽酸胍）會(huì )將DNA與二氧化硅結合。核酸結合后，用鹽/乙醇溶液洗滌二氧化硅離心柱或磁珠，以清除樣品中的其他生物分子。最后，使用Tris洗脫緩沖液或水洗脫離心柱或磁珠以洗脫純化后DNA。這種結合-清洗-洗脫過(guò)程非常耗時(shí)，需要多次清洗和移液步驟。重復的移液步驟會(huì )導致相當大的DNA損失（20-40%）和丟失。此外，高鹽溶液和其他雜質(zhì)很容易殘留進(jìn)洗脫的DNA或RNA中，損害最終的純度和定量以及下游的酶活性，如PCR。
BcMag?一步法細菌DNA純化試劑盒，可以從微生物（如革蘭氏陽(yáng)性或革蘭氏陰性細菌）中快速，無(wú)需離心柱提取基因組DNA。該試劑盒使用我們獨特的專(zhuān)有磁珠和緩沖液，可以有效裂解細胞，同時(shí)去除緩沖液中溶解的PCR抑制劑類(lèi)雜質(zhì)，不影響DNA使用。該提取過(guò)程采用溫和的裂解方式，避免了在苛刻的裂解條件下，如堿性裂解和使用有毒化學(xué)試劑時(shí)，對于裂解細胞核酸的損害，這樣就保持了DNA完整性和避免了從樣品中清除有機溶劑的耗時(shí)過(guò)程。此外，本產(chǎn)品中的磁珠在不用于提取DNA的情況下，也可在單個(gè)步驟中用于從樣品中清除PCR抑制劑（圖1）。使用本試劑盒提取核酸增加了DNA的完整性，提高了核酸產(chǎn)量，并將傳統的DNA純化技術(shù)中耗時(shí)的“結合-洗滌-洗脫”過(guò)程造成的DNA損失降至最低。在將樣本完全裂解后，它能夠在不到30分鐘的時(shí)間內完成超過(guò)96個(gè)樣品的DNA純化。純化出的基因組DNA具有高度的完整性，可用于各種下游應用，如qPCR、STR等。
BcMag? 一步法細菌DNA純化試劑盒工作流程
1. 使用鋼珠在打珠器中破碎樣品。
2. 離心并將上清液轉移到新試管中。
3. 將樣品與磁珠和蛋白酶K混合并加熱以裂解細胞。
4. 渦旋磁珠以捕獲PCR抑制劑。
5. 用磁力架吸附磁珠。
6. 吸出含有純凈DNA的上清液。
應用
純化的DNA可用于下游應用，例如PCR，qPCR，單核苷酸多態(tài)性（SNP），短串聯(lián)重復序列（STR）基因分型，基因分型，新一代測序（NGS，獸醫基因分型等）。
特點(diǎn)和優(yōu)勢：
l 快速高效的純化方案：無(wú)需液體轉移，只需一個(gè)試管，無(wú)需事先分離DNA，可直接用于放大實(shí)驗的工作流程。
l 節約時(shí)間成本：可在不到一小時(shí)內處理96個(gè)樣本。
l 最高的核酸回收率：提取過(guò)程中的DNA損失最小。
l 有效去除抑制劑：多酚化合物、腐殖酸/黃腐酸、酸性多糖、鞣質(zhì)、黑色素、肝素、洗滌劑、牛仔布染料、二價(jià)陽(yáng)離子，如Ca2+、Mg2+等。
l 性?xún)r(jià)比高：無(wú)需離心柱、過(guò)濾器、不用反復的重復移液和使用有機試劑。
l 可用于高通量實(shí)驗：與許多不同的全自動(dòng)核酸提取系統兼容。
